为什么通过电泳LAMP反应扩增的产物是梯形带？

DOI：可以参考本文中的灯管原理图，灯反应的产物很多，有线状、哑铃形、花椰菜状，含有目标片段的拷贝越多，产物越长，产物非常复杂，每个产物对应一个电泳带，所以灯管产品电泳带呈梯形。

PCR电泳带主要是琼脂糖凝胶电泳。 PCR方法具有灵敏度高、速度快等优点，但检测成本高，仪器昂贵，不适合基层单位应用。

环介导的等温扩增（LAMP）是Notomi等人于2024年开发的一种新的核酸扩增方法。 LAMP法针对靶基因的6个区域设计了6个特异性引物，采用链置换DNA聚合酶在恒温条件下完成高效的核酸扩增反应，具有特异性高、等温扩增的特点。

本研究针对侵袭质粒抗原H基因设计了志贺氏痢疾LAMP引物，对痢疾志贺氏菌进行检测，优化反应条件，测定检测的特异性和灵敏度，建立志贺氏痢疾检测方法，并与传统PCR方法进行比较。

你可以把灯产品想象成一个放大靶标的多聚体，有很多单元聚集在一起，所以有梯度带，有时点阱之间有梯度带和糊状带。

我觉得这两种方法的原理是完全不同的，灯，环介导的等温扩增法，英文名称是loop-mediatedisothermal

扩增是一种新型的核酸扩增方法，其特点是针对靶基因的6个区域设计4个特异性引物，以及DNA聚合酶（BST）的链置换。

DNAPOLYMERASE）、60--65恒温扩增，10、9、10、10倍的核酸扩增约15-60分钟即可实现。

PCR技术的基本原理类似于DNA的自然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。 PCR包括三个基本反应步骤： 变性-退火-延伸： 模板DNA变性：

模板DNA加热至93左右一段时间后，将PCR扩增形成的模板DNA双链或双链DNA解离，使其成为单链，使其与引物结合，为下一轮反应做准备; 模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA加热变性成单链后，温度降至55左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合; 引物延伸：DNA模板-引物偶联物在TaqDNA聚合酶的作用下，以DNTP为反应原料，靶序列为模板，根据碱基互补配对和半保留复制的原理，合成与模板DNA链互补的新型半保留复制链，重复循环变性-退火-延伸三个过程可获得更多的“半保留复制链”， 而这条新链可以成为下一个周期的模板。

每个周期需要 2 到 4 分钟才能完成，2 到 3 小时才能将基因扩增数百万倍。

酶、引物设计、扩增过程和产品测试都不同，所以应该没有太大关系。 虽然灯相对简单，但两者都有利有弊。

通常，PCR只有一个靶带。

但是灯会有很多放大带。

电泳的主要目的是看扩增的产物片段长度是否与目标产物一致，后期也可通过切割凝胶**来收集产物。 当然，产品的纯度和完整性也可以通过其亮度和宽度来判断。 非特定产品可以通过杂项带来判断。

并非每次PCR后都能完美运行目标片段，需要通过电泳提供客观依据。

你的意思是你的空白控件没有模板吗？ 引物可能形成二聚体、条带和片段较小。

如果底部条带为 100 bp，则您的亮条带是引物二聚体，即您没有扩增产物。

如果需要设计定量PCR引物，可以直接在“引物库”中搜索，而不是搜索序列、设计引物、选择参数、确定引物等，输入基因名称，直接提供引物序列，进行非特异性检测。

Web 链接。

PCR非特异性扩增是指PCR裂纹模具扩增的条带不是你想羡慕的引物。

在非目标频段与模板不匹配，导致扩展产品不是目标频段。 琼脂糖电泳中的非特异性扩增。

，您可以看到其他波段出现在目标波段之外。 非特异性扩增的原因有很多，如Mg2+浓度高、退火温度低、引物特异性差等。

房东，这个问题解决了吗？ 我也有这个问题。