如何用分光光度计制作标准曲线

1、编制相应的标准系列;

2.以空白为参比（或水）测量系列吸光度。

3、以标准溶液的吸光度为纵坐标，以相应标准溶液的含量为横坐标，求相对点;

5.由此，根据被测样品的吸光度求出相对含量;

配制相应的标准品系列，以空白为对照品（或水）的宏观裤子测定该系列的吸光度，以标准溶液的吸光度为纵坐标，以相应标准溶液的含量为横坐标，找出相对点，用直线连接各点，尽量将点落在顶部， 从而根据被测样品的吸光度求出相对含量。

标准曲线是由一系列已知成分的参考物质的物理和化学性质通过测量该性质的数值而组成的曲线。 标准曲线是参考物质的理化性质和仪器响应的函数。

在分析化学实验中，定量分析常用标准曲线法，标准工作曲线通常为直线。 与校准曲线不同，它是一系列标准溶液和介质绘制曲线。

校准曲线标准系列的相关组件必须与试样相匹配，以使测量结果准确。 只有当标准曲线与校准曲线重合时，才能使用标准曲线代替校准曲线。

扩展信息：分光光度计标准曲线的意义。

在特定波长条件下，用分光光度计测量一系列不同溶解度的标准溶液的吸光度值，以吸光度值为纵坐标，以相应的溶液浓度为横坐标。

可以在坐标纸上画一条穿过与吸光度和浓度成正比的原点的直线，称为标准曲线。 绘制标准曲线的实际意义在于，只要测量出吸光度值，就可以在标准曲线上找到相应的浓度值。

总结。 5）吸光度A的测量：仪器调整到0和100后，将选择开关转换为A的零旋钮，数字显示应为“。000”。然后拉出拉杆，将测得的溶液插入光路中，数显值为样品的吸光度a。

6）测量完成后，先打开样品室盖，然后关闭电源。比色皿在储存前应清洁。

7）浓度直读 按MODE键使CONIC指令亮，将校准浓度的溶液移入光路，按溶液调整键（0T键的100键），使数字显示为校准值，将测量溶液移入光路， 即读出相应的浓度值。

8）仪器数字显示屏后面，安装有接线柱，按下功能键即可输出模拟信号。

分光光度计的标准曲线和计算系数。

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可见光分光光度计是消音的，其波长范围为360nm和800nm，具有测量被测溶液的透射率（t）值、吸光度（a）、浓度的直接读数、垂直平行模拟信号输出等功能。 分光光度法主要是利用独特的吸收光谱来识别物质的性质和含量的技术，其理论基础是兰伯特和比尔定律。

使用方法： 1） 预热仪器。打开样品室的盖子（灯门自动关闭）。 打开电动磨模源，指示灯亮，仪器预热20min。 选择开关放置在“T”旋钮上，以便数字显示为”。

2） 旋转波长手轮，将所需波长与刻度标记对齐。

3） 将含有溶液的比色皿放入比色皿中，使参比溶液置于光路中。

4）盖上样品室盖子，调节透光率“100t”，旋转肢体姿势旋钮，使升数显示为“. （如果饥饿桶显示小于 100 吨，您可以按一次。

5）吸光度A的测量延时：仪器调整到0和100后，将选择开关转换为A的零旋钮，干梅的数字显示应为”000”。

然后拉出拉杆，将测得的溶液插入光路中，数显值为匹配样品的吸光度a。

6）测量完成后，先打开样品室盖，然后关闭电源。比色皿在储存前应清洁。

7）浓度直读 按MODE键使CONIC指令亮起，将已校准的溶液交接至浓度代码并移入光路，按溶液的调整键（0T键的100键），使数字显示为校准值， 将测得溶液移入光路，读取渣模对应的浓度值。

8）仪器数字显示屏后面，安装有接线柱，按下功能键即可输出模拟信号。

光谱法标准曲线延迟线的绘图评价：标准曲线是直接由标准溶液制成的曲线，用于描述被测物质的浓度（或含量）与分析仪器的响应信号值之间的定量关系。

绘制标准曲线的意义：绘制标准曲线的实际意义在于，只要测量出吸光度值，就可以在标准曲线上找到相应的浓度值。 物质与光相互作用，具有选择性吸收的特性。

有色物质的颜色是由物质与光的相互作用产生的。 也就是说，有色溶液所表现出的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收。

选择吸收。 物质与光相互作用，具有选择性吸收的特性。 有色物质的颜色是由物质与光的相互作用产生的。

也就是说，有色溶液的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收。 由于不同物质的分子结构不同，对不同波长的光具有不同的吸收能力，因此在具有特征结构的结构基团中存在具有选择性吸收特性的最大接收波长，并在第一个形状中形成最大吸收峰，从而产生独特的吸收光谱。

标准曲线的实践。

1）标准浓度的选择：在准备标准曲线时，标准浓度的选择一般应包括待测样品可能变化的最低值和最高值，一般可以选择5个浓度。浓度差异最好相乘或分级，并应在与供试品溶液相同的条件下测定。

2）标准溶液的测定：在比色测定过程中，至少读取光密度2-3倍，并找到其平均值，以减少仪器不稳定引起的误差。

3）标准曲线图的绘制：一般常用的是光密度和浓度的标准曲线。

在普通方格纸上绘图。 图纸最好是正方形（length：width=l：

1）或矩形（长：宽=3：2），以横轴为浓度，以纵轴为光密度，一般浓度的全距离占据多少个网格，光密度的全距离也应占据相同数量的网格。

在适当范围内制备各种不同浓度的标准品，求其光密度，绘制标准曲线，在浓度位置向上延伸，将光密度位置向右延伸，交点为坐标标点。 然后，将坐标和原点组合成一条线，如果它符合朗伯特-比尔定律，则它是一条穿过原点的直线。

标准曲线绘制后，应在坐标纸上标明实验项目名称、所用色度计的型号和仪器编号、滤光片编号或单色光波长、绘制日期、室温。

绘制标准曲线：一般应测量两次或三次以上，并可应用曲线的重复性。

绘制的标准曲线将来只能用于在相同条件下测定相同的物质。 当仪器更换、仪器位置移动、试剂更换、室温变化明显时，需要重新绘制标准曲线。

标准曲线横坐标刻度：从标准品的含量转换为待测溶液的浓度。