寻求基因组DNA提取方案，完整，谢谢！！

人体细胞 - 稀盐酸破坏细胞膜（内容物流出），然后离心。

DNA提取主要有CTAB法，其他方法包括玻璃珠法、超声波法、研磨法、洞穴冻融法等物理方法。 化学方法如异硫氰酸胍法、碱裂解法等。 生物方式：

酶法。 根据核酸分离纯化方法的不同，有硅质材料、阴离子交换树脂等。

主要分类： 真核DNA、细菌DNA、病毒DNA、质粒DNA、细胞悬浮DNA、组织DNA。

双股环、双股线性、单股环。

细胞核DNA、细胞器DNA

提取原理。 1.确保核酸一脚封闭级结构的完整性;

2.不应有有机溶剂抑制核酸样品中橡胶裂纹高的酶和金属离子。

3.应尽量减少其他生物大分子（如蛋白质、多糖和脂质分子）的污染;

4.其他核酸分子，如RNA，也应尽可能去除。

样品制备。 生物组织。

一。 如果不能立即提取，最好储存新鲜组织，-70或液氮。

二。 液氮冻结、压碎和研磨。

三。 组织均质法。

四。 液氮均质法。

1.解决方案 I — 裂解液：

溶菌酶：它是一种糖苷水解酶，能水解肽聚糖中的-1,4糖苷键，肽聚糖是细菌细胞壁的主要化学成分，因此具有裂解作用。 当溶液中的pH值小于8时，溶菌酶的作用受到抑制。

葡萄糖：增加溶液的粘度，保持渗透压，防止DNA被机械剪切力降解。

EDTA：1）螯合Mg2+、Ca2+等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解（DNase过程中需要一定的金属离子作为假体基团）;

2）EDTA的存在有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应需要离子强度低的环境。

2.溶液II-NaOH-SDS溶液：NaOH：

核酸在pH值大于5且小于9的溶液中稳定。 但是，当pH值>12或pH<3时，会引起双链间氢键的解离和变性。 溶液II中NaOH的浓度是系统的pH值与加入提取物时一样高，从而促进染色体DNA和质粒DNA的变性。

SDS：SDS是一种离子表面活性剂。 其主要功能是：

1）溶解细胞膜上的脂质和蛋白质，从而溶解膜蛋白并破坏细胞膜。

2）细胞中核蛋白的解聚。

3）SDS可以与蛋白质结合成为R-O-SO3-...R+-蛋白质复合物，使蛋白质变性并沉淀。 然而，SDS抑制核糖核酸酶的作用，因此必须在提取过程中将其去除，以防止下一步（使用RNase去除RNA时）的干扰。

3.溶液III - 3mol L Naac（溶液：

NAAC的水溶液是碱性的，为了将pH值调节到pH值，必须加入大量的冰醋酸。 因此，该解决方案实际上是NAAC-HAC的缓冲区。 使用的NaAC溶液是将提取物的pH值恢复到中性，使变性的质粒DNA可以重新折叠并稳定。

3mol L NaAC的高盐有利于变性大分子染色体DNA、RNA和SDS-蛋白复合物的缩合和沉淀。 前者相互聚合，因为它中和了核酸上的电荷并降低了排斥力。

这种生物的大部分词语都来自西班牙，这意味着一切都是由细胞组成的。

您好，很高兴能够为您回答这个问题。 原理：从细胞中分离出的DNA是与蛋白质结合的DNA，蛋白质中还含有大量的RNA，即核糖核蛋白。

如何有效地分离这两种核蛋白是该技术的关键，而盐洛乔法是DNA提取的常规技术之一。 在核酸的制备中，通常通过研磨破坏细胞壁和细胞膜，从而释放核蛋白。 DNA不溶于RNA核蛋白，RNA核蛋白可溶于RNA，需要进一步去除蛋白质等杂质，使用Naci溶液从样品破碎的细胞液中分离DNA和RNA核蛋白。

除去蛋白质的方法有3种，用含有辛醇或异戊基的氧仿振荡核蛋白溶液进行乳化，然后离心除去变性蛋白，用这种方法处理时，蛋白质停留在水相和氯仿相之间，DNA溶解在上层水相中，DNA的钠盐可用两倍体积的95%乙醇溶液沉淀。 十二烷基硫酸钠（SDS）等洗涤剂用于使蛋白质变性，以将其与核酸分离，也可以直接从材料中提取DNA。 将DNA溶解在上层水相中，蛋白质变性后停留在酚层中，吸出上层水相，加入两倍体积的95%乙醇，得到白色纤维状DNA沉淀。

反复使用上述方法对DNA核蛋白溶液进行多次处理，可以更彻底地去除蛋白质等杂质，得到更纯净的DNA产物，本实验中采用CTAB方法从植物幼苗中提取基因组DNA为了彻底去除DNA产物中受污染的RNA杂质，可以使用RNA酶，生物材料中含有大量的脂质控制物质和多糖，当核蛋白在盐溶液中分离并用乙醇或异丙醇分馏时，可以将其去除。 核酸纯化目标：

纯化的核酸样品中不应存在抑制酒精的有机溶剂和过高浓度的重金属离子：应尽量减少蛋白质、多糖和脂质分子等其他生物大分子的污染：应排除RNA分子污染。

希望对您有所帮助，简单原理：原理：1

溶解在NAC1溶液中的沉淀物用冷醇萃取，杂质较少的沉淀在沸水浴中用二苯胺染成蓝色。

这是一种非常高级的科学知识，在生物体内，它们都是基于细胞膜、细胞质等物质，然后可以通过分离来解除。

从植物组织中提取基因组DNA

1.材料。 嫩叶。

2.设备。 移液器，冷冻高速离心机，台式高速离心机，水浴，陶瓷研钵，50ml离心管（带盖）和5ml离心管，弯曲成钩的小玻璃棒。

3.试剂。 1. 提取缓冲液：100 mmol ltris·cl，，20 mmol ledta，500 mmol lnacl，.

2.提取缓冲液：葡萄糖、二硫代碳酸二乙酯、240ul巯基乙醇，加水至300ml。

4：16 氯仿：戊醇：乙醇。

4.RNA SEA母液。

5.其他试剂：液氮、异丙醇、TE缓冲液、无水乙醇、70%乙醇、3mol LNAAC。

四、操作步骤：

1.将20ml提取缓冲液加入50ml离心管中，并在60ml水浴中预热。

2.幼苗或叶5-10g，切碎，在研钵中加入液氮研磨成粉，立即倒入预热的离心管中，剧烈摇晃混合，60水浴保温30-60分钟（时间长，DNA产率高），不时摇匀。

3.加入氯仿戊醇乙醇溶液20ml，倒置混合（需戴手套防止损坏**），室温静置5-10分钟，使水相和有机相分层（必要时重新混合）。

4.在室温下以5,000rpm离心5分钟。

5.小心地将上清液移液到另一个50ml离心管中，加入1体积的异丙醇，充分混合，并在室温下放置片刻，以出现絮状DNA沉淀。

6.将 1 mlte 添加到 . 用带钩的玻璃棒去除DNA絮凝体，将其吸干在干净的吸水纸上，然后将其转移到含有Te的离心管中，DNA在Te中迅速溶解。

7.如果 DNA 不形成絮凝沉淀物，则可以使用 5000 rpm 离心 5 分钟将沉淀转移到 TE 管中。 这样收集的沉淀通常难以溶解在TE中，可以在60水浴中放置15分钟以上以帮助溶解。

8.将DNA溶液以3,000rpm离心5分钟，并将上清液倒入干净的5ml离心管中。

9.加入5 lRNA sea（10g L）37 10分钟以除去RNA（RNA通常对DNA操作和分析没有影响，此步骤可以省略）。

10.加入 1 10 体积的 3mol LNAAC 和 2 体积的冰乙醇，充分混合，-20 并放置约 20 分钟，DNA 形成絮凝沉淀物。

11.用玻璃棒取出DNA沉淀，用70%乙醇冲洗，然后在干净的吸水纸上吸干。

12.将DNA重新溶解在1mlTe，-20中并储存。

13.取 2 个 LDNA 样品并在凝胶上电泳以检测 DNA 的分子大小。 同时，将15 L稀释20倍，测定OD260 OD280检测DNA含量和质量。

注] 5 g 样品保证 500 g DNA，足以用于 RFLP、PCR 等。

DNA提取主要以CTAB法为主，其他方法包括玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法等物理方法。 化学方法如异硫氰酸胍法、碱裂解法等。 生物方式：

酶法。 根据核酸分离纯化方法的不同，有; 硅质材料、阴离子交换树脂等

提取基因组DNA和核DNA是提取细胞核的另一种方法，首先要打破细胞并分离细胞核，在甘油或其他保护剂中进行SDS十二烷基磺酸钠：它可以破坏细胞膜，核膜，并将组织蛋白从DNA中分离出来 CATb是一种提取溶液，破坏细胞膜 特别忘记DNA不溶于异丙醇， 异丙醇能使DNA沉淀，产生白色絮状沉淀物，用移液管挑出。

以下是一些具体方法，希望能有所帮助。