绿色荧光蛋白的蛋白质应用，绿色荧光蛋白的蛋白质特性

GFP荧光极其稳定，在激发光照射下，GFP比荧光素具有更强的抗光漂白性，特别是在450 490nm蓝色波长处。

GFP需要在氧化状态下发出荧光，强还原剂将GFP转化为非荧光形式，但一旦重新暴露于空气或氧气中，GFP荧光立即恢复。 一些弱还原剂不影响GFP荧光。 中度氧化剂对GFP荧光的影响也很小，如生物材料的固定，脱水剂戊二酸或甲醛。

GFP-融合蛋白的荧光灵敏度远高于荧光素标记的荧光抗体，抗光漂白性更强，因此更适合定量测定和分析。 然而，由于GFP不是一种酶，荧光信号没有被酶放大，因此GFP的敏感性可能不如某些酶报告蛋白。

由于GFP荧光是生物细胞的自主功能，荧光的产生不需要任何外源反应底物，因此GFP作为一种广泛使用的活报告蛋白，具有任何其他酶报告蛋白无法比拟的作用。

您好，GFIN分子的形状是圆柱形的，就像一个水桶，负责发光的基团位于水桶中**，因此GFP可以比作一个装满颜料的“油漆桶”。 “桶”中包含的发光基团对蓝光特别敏感。 当它被蓝光照射时，它吸收了蓝光的一部分能量，然后发出绿色荧光。

利用这一特性，生物学家可以用绿色荧光蛋白标记几乎任何生物分子或细胞，然后可以在蓝光下显微镜下观察。 原本黑暗或透明的视野立即变成了星光灿烂——这是活动的明显目标。 在绿色荧光蛋白的发现和应用之前，对活体生物样品的实时观察是不可想象的。

这种彻底改变了生物学研究的蛋白质最初是从一种广泛生活在太平洋的发光水母中分离出来的。

在自然界中，具有发光能力的生物很多，萤火虫是陆地上最熟悉的发光生物，中国古代有个好故事，“捕捉萤火虫成百上千袋，照亮夜读”。 在海洋中，某些水母、珊瑚和深海鱼类也具有发光的能力。 特别是，一些肉食性鱼类依靠发光的触角将其他小鱼吸引到嘴里，就像《海底总动员》中的情况一样。

事实上，大多数发光动物之所以能够发光，是因为两种物质的合作，荧光素和荧光素酶。 荧光素和荧光素酶的结构对于不同的发光生物是不同的。 因此，这些生物的发光能力只能是它们自己的“专利”。

20世纪60年代，一位日本科学家从美国西海岸打捞出大量发光水母，并将它们带回华盛顿州的实验室进行研究。 这些水母在受到外界干扰时会发出绿色荧光，科学家希望找到这种水母的荧光素酶。 然而，经过长时间的反复努力，没有结果。

他大胆地假设，学名Aequorea Victoria的水母可以发光，也许不是传统的荧光素酶原理。 他认为可能还有另一种产生荧光的蛋白质。 之后，他又进行了更多的实验，终于弄清楚了这种水母的特殊发光原理。

原来，在这种水母体内，有一种叫做aequorin的物质，它与钙离子结合时会发出蓝光，而这种蓝光已经被一种蛋白质吸收而没有被看到，它变成了绿色荧光。 这种捕获蓝光并发出绿光的蛋白质称为绿色荧光蛋白。 这位日本科学家还因为这一发现获得了刚刚颁发的诺贝尔化学奖，他就是日本科学家下村修。

希望对你有所帮助。

质粒可以被复制和转染，使其在细胞内表达，并且可以在汞灯的激发光下发出绿色荧光。 一般用作实验中的参考。 下面是一个简单的示例：

干扰细胞系的构建是可以看到绿色荧光蛋白的表达干扰了细胞系的构建过程。 此外，通过免疫学技术显示蛋白质表达，通常是半定量的。

分析：A中不需要那么多氨基酸，B中是正确的（参考分泌蛋白）。

c中不需要加热。

d中高温不会破坏肽键，但会破坏蛋白质的空间结构。

分析： 答：不需要那么多氨基酸。 生物界有20多种氨基酸。

B：正确。 c：无需加热即可检查。

D：在这里，高温不会破坏肽键，而是破坏蛋白质的空间结构。

常见的氨基酸大约有20种，但并不是每种蛋白质都有20种氨基酸，错误是“至少”。 蛋白质不需要加热即可进行缩二脲测试。 d高温加热破坏的是空间结构，而不是肽键。