关于限制性内切酶的生物学问题

我认为你是对的，假设有一个带有 CGTacc 的碱基序列，那么识别 GGTACC 的限制性内切酶不识别该序列中的 GTAC。 建议大家请老师理解，毕竟学习是你自己的，有时候老师会犯错。

老师说得对，GTAC只是GGTACC中的一个片段，既然整个片段是可识别的，那么其中的片段肯定是可识别的。 但是，仅仅因为你只能识别它的一小部分，就说它能识别它的全部是不对的。

没错，限制性内切酶在识别过程中不需要考虑正反，也就是说，在生物学中，例如，限制性内切酶的识别末端序列是ccatgg，他可以识别ggtacc序列。

1）温度：大多数限制性内切酶。

最佳反应温度为37，少数酶高于或低于该温度。

3）溶液系统：需要稳定的pH环境。（4）盐离子浓度：不同的限制性内切酶对盐离子强度（Na+）的要求不同。

5）反应体积和甘油。

浓度：进行酶消化反应时，酶的体积一般不超过总反应的10%，如果酶的体积过大，甘油浓度过高，就会影响酶的消化反应。

6）DNA的纯度和结构：DNA样品中所含的蛋白质、有机溶剂和RNA等杂质会影响酶消化反应的速度和酶消化的完整性，酶消化的底物一般为双链DNA，DNA的甲基化位置会影响酶消化反应。

答案：B

评估此测试问题"限制性内切酶功能"。限制性核酶，也称为限制性核酸内切酶，是一种 DNA 核酸内切酶，可识别特定的 DNA 序列，在识别序列中或附近切割和切割双链 DNA。 根据酶的不同，DNA切割产生的缺口可以是钝的（在同一水平上切割双链）或粘性的（在不同水平上切割双链并交错）。

产生粘性末端的酶裂解 DNA，虽然交错，但不能被认为是裂解的单链，也不是裂解的错配 DNA。

两者的区别：限制性内切酶的主要功能是保护细菌免受噬菌体感染，而核酸外切酶水解的最终产物是单核苷酸（DNMP为DNA，NMP为RNA）。

核酸内切酶：在核酸水解酶中，核酸内切酶是一种在可水解分子链内产生磷酸二酯键的寡核苷酸的酶，对应于核酸外切酶。

核酸外切酶：核酸外切酶是一类酶，可以依次催化多核苷酸链一端磷酸二酯键的水解以降解核苷酸。

限制性内切酶是一类酶，可识别并附着双链 DNA 分子中的特定脱氧核苷酸序列，从而切割 DNA 双链磷酸二酯键，从而产生两种类型的裂解末端，粘性末端和齐头。

影响限制性内切酶活性的因素多种多样，稍有不慎就可能导致酶消化反应失败。

1.保护底座。

当酶蛋白被切割时，它需要占据识别位点两侧的几个碱基，这称为保护碱基。

2.质粒高阶结构。

一些限制性内切酶不能切割具有高级结构的质粒，因此需要适当增加酶的用量，或者在切割前用能够适应高级结构的限制性内切酶对质粒进行线性化。

3.甲基化保护。

甲基化是细菌用来保护自己免受内源性核酸内切酶切割的一种机制。 常见甲基化：DAM+、DCM+、EcoKi+、EcoBi+、CPG（真核细胞）等。

在实验中注意宿主细胞的甲基化信息是很重要的。

答：c限制性内切酶多存在于细菌中，其生物学意义在于外源DNA的酶解;然而，细菌本身的DNA不能被切割，因为它在酶切割位点受到甲基化的保护，这是限制性有正神峰核酸内切酶的特征。