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目的建立一种聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法检测结核分枝杆菌RPOB基因突变,并评价其临床应用价值。 方法根据结核分枝杆菌RPOB基因的defampicin测定区设计引物,采用PCR扩增临床分离株和直接痰液样本的RPOB基因片段。 对扩增的RPOB基因片段进行DNA SSCP分析,随机测定RPOB片段的序列。 结果PCR扩增212株结核分枝杆菌全部230 bp片段,135份抗酸染色阳性痰标本中113份扩增阳性片段(.
SSCP分析中,140例结核分枝杆菌采用L-J药敏试验,130例采用RPOB基因突变检测(符合率),72例采用LJ药敏试验检测为利福平敏感,67例无RPOB基因突变(符合率。 测序分析显示,SSCP检测到突变的RPOB片段有57个序列变化,SSCP检测到的10个RPOB片段中有8个没有序列变化,表明SSCP与测序结果的吻合率如下。 在这项研究的菌株中,耐多药结核病(MDR-TB)占了比例,SSCP检测到一些具有RPOB突变的耐多药菌株。
结论PCR-SSCP分析法是一种更准确、更稳定的结核分枝杆菌IPOB基因突变检测方法,可用于快速分析结核分枝杆菌对利福平患者的耐药性,可作为耐多药结核病诊断的重要指标。
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使用 NCBI 查找基因序列教程。
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在NCBI或GeneBank上找到至少10个序列,并使用分子生物学软件对齐它们,就可以找到保守的序列。 当我发现HIV-1的保守序列时,我就是这样做的,引物基本上被扩展了。 尝试。
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Clustx 可对齐多种相关蛋白质的序列。 如果要设计简并引物,可以先做块再做跳码,搜索**,就可以**做**。
您可以通过 Google 搜索找到它。
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NCBI,如果有序列号,请直接输入。 不,可以通过查找物种和基因名称在 NCBI 中进行搜索。
步骤:1打开。
2.上面有一个搜索栏,默认是pubmed,打开下拉菜单,选择gene,在右侧输入"基因的名称"and"物种名称",单击搜索。
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还有不同物种的专门数据库,如拟南芥(Tair)、水稻(Tigr)和玉米(MaizeSequence)。
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在 PubMed 上
基因库,输入你要找的基因名称,最好输入物种缩小范围,这样很多摘要还是会出来的,仔细看看描述,找到你需要的,点击进去,就是全基因组的序列。 我不能告诉你具体细节,你找到一本关于生物信息学的书,里面有一切要谈的,你可以自己好好看看。 推荐大家看一看张成刚和何福初的《生物信息学方法与实践》,虽然是02年编辑的,但我觉得还是不错的,而且不厚,相信看完之后对你的研究工作也会有所帮助。
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在NCBI上方找到基因序列的方法如下:首先打开NCBI**主页,然后在搜索栏中选择核苷酸,在框中输入你想要的基因序列名称,点击搜索。 然后会有很多结果,因为很多基因都同名,或者一个基因在不同的物种中不同,只要寻找想要的基因序列就行了。
需要注意的是,要确定基因名称是否统一并找到基因序列,蛋白质序列很容易,因为结果中显示了基因的蛋白质序列。 您可以在搜索开始时选择蛋白质,您找到的就是蛋白质序列。
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通常,在顶部字段中输入基因的英文名称。
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4.向下滚动以查找序列。
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使用 NCBI 查找基因序列教程。
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转录本是剪接成高能 RNA 的基因序列过去,据说转录本可以表达蛋白质。 现在关于lncRNA的研究比较多,也说它是一种转录本。
也没有参考基因组序列,一般不可能去功能注解。 因为当你去功能评论时需要有一个背景。
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NCBI首页顶部搜索栏左侧有一个数据库选择框,点击下拉三角形选择核苷酸(如图中红色框所示),在搜索栏中输入基因名称进行搜索。 以人类orc1基因为例,在搜索结果中选择mRNA和completecds序列的结果即可,点击进入序列文件查看详情,上图中的搜索结果18就是一个例子,点击界面Lu Shenoak如下,找到cds标签下来, 点击CDS跳出下面这个界面,界面旁边有棕色标记的序列就是cDNA序列,旁边有对应的氨基酸序列。如果搜索结果太多,可以在搜索结果中按物种进行筛选,如下面的红框所示。
这是基本步骤。
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我平时在NCBI上找,世界上有三大数据库,NCBI就是其中之一,美国,这个我觉得是最好的。
查找上述基因序列的方法如下:首先打开NCBI**主页,然后在搜索栏中选择核苷酸,在框中输入你想要的基因序列名称,点击搜索。 然后就会有很多结果出来,因为很多基因都有相同的名称,或者一个基因在不同的物种中是不同的,只要寻找你想要的基因序列就行了。
请注意,为了确定你的基因名称是否统一,我曾经花了很多时间寻找一个基因,然后发现我并没有普遍使用它。 找到基因序列,蛋白质序列很容易,因为该基因的蛋白质序列显示在结果中。 您也可以在开始搜索时选择蛋白质,您找到的就是蛋白质序列。
多尝试一下是件好事,其实很简单,如果你的英语很好,那就更简单了。 要有耐心。
只要已经测序的基因是可用的,这就是最完整的基因库。 剩下的就不用想了,如果找不到,只能考虑我上面的经验。
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就是这么简单,你知道为什么四叶草这么难找吗,因为它是不光合作用的三叶草,而且多了一片叶子,这说明如果你去找它,你可以去一个阳光照射不到的地方,你可以慢慢寻找它。